近十年來 以錶皮生長因子受體酪氨酸激酶抑製劑（EGFR-TKI）為代錶的分子靶嚮治療 《自然·癌癥》：第四代EGFR TKI臨床開發邁齣關鍵一步 - 趣味新聞網

近十年來，以錶皮生長因子受體酪氨酸激酶抑製劑（EGFR-TKI）為代錶的分子靶嚮治療，為肺癌的治療帶來瞭巨大的變革，但 藥物的耐藥性仍是一個懸而未決的難題 [1]。

以EGFR-TKI為例，在攜帶有EGFR突變的非小細胞肺癌（NSCLC）患者中往往一開始是有效的，但常演變為獲得性耐藥而失去治療作用，如導緻第一/二代EGFR-TKI耐藥的T790M突變和導緻第三代EGFR-TKI耐藥的C797S突變等，尤其是同時含有L858R/T790M/C797S突變的腫瘤，目前已有的EGFR-TKI對其束手無策[2, 3]。

山窮水復疑無路，柳暗花明又一村。 研究人員開始嘗試開發第四代EGFR抑製劑，去剋服EGFR突變所緻EGFR-TKI耐藥 。

2016年，第一個EGFR變構抑製劑EAI045被發現，拉開瞭第四代EGFR抑製劑登場的序幕 。其作用位點為L858R突變形成的一個獨特的位點，該位點與ATP競爭性EGFR-TKI結閤位點不同，因此不會受到影響TKI療效的獲得性EGFR突變的影響，為剋服耐藥EGFR突變提供瞭新的策略[4]。然而， EAI045需要EGFR單抗共同給藥來破壞不對稱的EGFR二聚化，從而允許EAI045與EGFR二聚體的兩個單體結閤[4]。這顯然不便於臨床上的使用 。

2019年，由 哈佛醫學院丹娜-法伯癌癥研究中心的Michael J. Eck、Nathanael S. Gray、Pasi A. J nne領銜團隊 ，報道瞭一種突變選擇性EGFR變構抑製劑――JBJ-04-125-02[5]。研究顯示，它在體外和體內對EGFR L858R/T790M/C797S突變均有效，但遺憾的是， JBJ-04-125-02單一治療在患者來源的細胞係或異種移植模型中無效 [5]。

好消息是， 上述三位教授聯閤同單位的David A. Scott 教授團隊 對JBJ-04-125-02進行改進， 發現瞭新的更有效的EGFR變構抑製劑――JBJ-09-063，並在體外和體內對其進行瞭錶徵。

近日，他們的研究發現， 與JBJ-04-125-02相比，JBJ-09-063具有更好的藥代動力學和療效，它對導緻EGFR-TKI耐藥的模型，如EGFR T790M突變和C797S突變，都具有良好的治療效果 ，相關結果發錶在著名雜誌《自然・癌癥》上[6]。

JBJ-09-063改進的藥理特性使第四代EGFR抑製劑的臨床開發邁齣瞭關鍵一步 ，其對導緻第一/二/三代EGFR-TKI耐藥的EGFR突變腫瘤具有良好的抑製效果，尤其是與第三代EGFR-TKI聯用，堪稱治療NSCLC的“大殺器”。

論文首頁截圖

為瞭確定一種更有效的變構抑製劑，研究團隊對JBJ-04-125-02進行改造，並鑒定齣 JBJ-09-063是一種高效的EGFR變構抑製劑 。

酶學分析錶明，相比於JBJ-04-125-02和奧希替尼（第三代EGFR-TKI）， JBJ-09-063對EGFR L858R/T790M和EGFR L858R/T790M/C797S的抑製作用更強，且不受C797S突變的影響（奧希替尼受C797S突變影響） 。

在EGFR L858R/T790M和EGFR L858R/T790M/C797S BA/F3細胞係中，JBJ-09-063比JBJ-04-125-02對細胞生長的抑製作用更強（約10倍），對EGFR磷酸化抑製的作用也更強 。在對吉非替尼耐藥的EGFR L858R/T790M BA/F3細胞中，JBJ-09-063對細胞生長的抑製作用與奧希替尼相當，在對奧希替尼耐藥的EGFR L858R/C797S BA/F3細胞中，JBJ-09-063對細胞生長的抑製作用與吉非替尼相當。

細胞學研究中，JBJ-09-063展示齣瞭比JBJ-04-125-02和奧希替尼更好的抑製突變EGFR的效果

緊接著，研究人員比較瞭JBJ-09-063和JBJ-04-125-02的藥代動力學特性。發現JBJ-09-063有著更高的靜脈內清除率（5.0ml/min/kg vs 15.7ml/min/kg）和生物利用度（14.6% vs 3%）。不難看齣，JBJ-09-063藥代動力學優於JBJ-04-125-02，且有著更好的藥理學特性。

因此，理論上JBJ-09-063將有更好的體內療效。

研究人員構建瞭均含有EGFR L858R/T790M突變的H1975細胞（人肺腺癌細胞）和患者來源的DFCI52細胞異種移植腫瘤模型，以評估JBJ-09-063在體內的作用。

在H1975模型中， JBJ-09-063可使腫瘤體積呈劑量依賴性縮小，並且比JBJ-04-125-02更有效 。值得注意的是，50mg/kg和100mg/kg劑量的JBJ-09-063與25mg/kg奧希替尼的治療效果相當。在DFCI52模型中，50mg/kg劑量的JBJ-09-063與奧希替尼的治療效果相當。

JBJ-09-063在體內對EGFR L858R/T790M突變腫瘤具有良好的治療作用

同樣的， 在DFCI52-C797S和H3255GR-C797S細胞構建的異種移植腫瘤模型（對奧希替尼耐藥）中，JBJ-09-063同樣具有顯著的治療作用 。

JBJ-09-063在體內對EGFR C797S突變腫瘤具有良好的治療作用

但齣人意料的是，體外的DFCI52細胞和H3255GR細胞（細胞具有EGFR T790M突變，對吉非替尼耐藥）對JBJ-09-063並不如在體內時那麼敏感，而當ATP競爭性EGFR抑製劑吉非替尼與JBJ-09-063聯用後，可顯著抑製DFCI52細胞和H3255GR細胞的生長。

體外的DFCI52細胞對JBJ-09-063耐藥，但和吉非替尼聯用後可顯著抑製細胞生長

同樣，在體內對JBJ-09-063敏感的H3255GR-C797S和DFCI52-C797S（細胞具有EGFR C797S突變，對奧希替尼耐藥）細胞，在體外也對JBJ-09-063耐藥，JBJ-09-063和奧希替尼聯用可逆轉這一耐藥性。

研究人員猜想，這些細胞在體外培養時，必然因某些原因使得EGFR構象改變，使得原本對JBJ-09-063敏感的細胞變得耐藥，而EGFR TKI可以逆轉這一耐藥性。

經過研究，研究人員發現原來是由於 培養基中的ERBB傢族配體（如EGF和NRG1）與EGFR結閤，導緻EGFR與自身或其他ERBB傢族成員二聚化，使得JBJ-09-063無法抑製EGFR的磷酸化，從而齣現瞭耐藥性 。而EGFR-TKI與EGFR的結閤抑製瞭二聚體的形成，從而恢復瞭細胞對JBJ-09-063的敏感性。

對奧希替尼耐藥的除瞭常見的C797S之外，還有一些突變也可導緻對奧希替尼耐藥，包括L718Q突變、L792F突變和G796S突變[7]，這些突變局限於ATP位點，影響奧希替尼與位點的結閤，但理論上不會影響與變構抑製劑的結閤。

C797S突變、L718Q突變、L792F突變和G796S突變影響奧希替尼與位點的結閤，但理論上不會影響與變構抑製劑的結閤

為瞭驗證JBJ-09-063在這些突變的情況下是否有效，研究人員構建瞭EGFR LT/L718Q、EGFR LT/L792F和EGFR LT/G796S的BA/F3細胞，並比較瞭JBJ-09-063和奧希替尼對細胞生長和EGFR的影響。實驗結果證實這些突變體細胞確實對奧希替尼耐藥，但對JBJ-09-063的敏感性都更高，JBJ-09-063能使這些細胞中EGFR磷酸化水平降低，從而抑製EGFR信號轉導和細胞生長。這些實驗錶明， JBJ-09-063可廣泛有效地治療對奧希替尼耐藥的EGFR突變腫瘤 。

盡管JBJ-09-063對導緻奧希替尼耐藥的EGFR突變有效，但很可能存在EGFR突變可介導對JBJ-09-063的耐藥性。

為瞭鑒定JBJ-09-063耐藥突變，研究人員用1μM JBJ-09-063、1μM奧希替尼或兩者聯閤處理BA/F3細胞來篩選耐藥細胞係（每種用法處理900個細胞剋隆）。 在JBJ-09-063和奧希替尼處理的細胞剋隆中，分彆有76個和13個細胞剋隆生長，當兩種藥物一起處理細胞時，沒有任何細胞剋隆生長 。

篩選對JBJ-09-063耐藥細胞係

通過對76個JBJ09-063耐藥細胞剋隆的EGFR 酪氨酸激酶（TK）結構域進行測序發現，在76個JBJ09-063耐藥剋隆中，3個（3.94%）含有L747S突變，其他73個JBJ-09-063耐藥剋隆中沒有發現任何EGFR TK區突變。

通過建模分析，研究人員發現L747的側鏈與JBJ-09-063的苯環可形成良好的疏水接觸，而L747S突變則會減少這種接觸。在錶達EGFR LT/L747S的BA/F3細胞中，JBJ-09-063的作用降低，這驗證瞭L747S突變的確可導緻JBJ-09-063耐藥。

在本研究中，研究人員 確定瞭第四代EGFR抑製劑JBJ-09-063，其對導緻EGFR-TKI耐藥的EGFR突變具有良好的抑製作用 。

研究人員還發現EGFR與自身或ERBB傢族其他成員的同源或異源二聚，以及EGFR L747S突變，會導緻JBJ-09-063耐藥，但與EGFR-TKI聯用可很好地解決這一耐藥性。

總體而言，JBJ-09-063是具有突齣臨床潛力第四代EGFR抑製劑，可作為單藥或與EGFR-TKIs聯用來治療EGFR突變肺癌，期待其早日進入臨床，彌補EGFR-TKIs治療的不足。

參考文獻

1.Marasco M, Misale S: Resistance is futile with fourth-generation EGFR inhibitors. Nat Cancer 2022.

2.Soria JC, Ohe Y, Vansteenkiste J, Reungwetwattana T, Chewaskulyong B, Lee KH, Dechaphunkul A, Imamura F, Nogami N, Kurata T et al: Osimertinib in Untreated EGFR-Mutated Advanced Non-Small-Cell Lung Cancer. N Engl J Med 2018, 378(2):113-125.

3.Rangachari D, To C, Shpilsky JE, VanderLaan PA, Kobayashi SS, Mushajiang M, Lau CJ, Paweletz CP, Oxnard GR, Janne PA et al: EGFR-Mutated Lung Cancers Resistant to Osimertinib through EGFR C797S Respond to First-Generation Reversible EGFR Inhibitors but Eventually Acquire EGFR T790M/C797S in Preclinical Models and Clinical Samples. J Thorac Oncol 2019, 14(11):1995-2002.

4.Jia Y, Yun CH, Park E, Ercan D, Manuia M, Juarez J, Xu C, Rhee K, Chen T, Zhang H et al: Overcoming EGFR(T790M) and EGFR(C797S) resistance with mutant-selective allosteric inhibitors. Nature 2016, 534(7605):129-132.

5.To C, Jang J, Chen T, Park E, Mushajiang M, De Clercq DJH, Xu M, Wang S, Cameron MD, Heppner DE et al: Single and Dual Targeting of Mutant EGFR with an Allosteric Inhibitor. Cancer Discov 2019, 9(7):926-943.

6.To C, Beyett TS, Jang J, Feng WW, Bahcall M, Haikala HM, Shin BH, Heppner DE, Rana JK, Leeper BA et al: An allosteric inhibitor against the therapy-resistant mutant forms of EGFR in non-small cell lung cancer. Nat Cancer 2022.

7.Lin L, Lu Q, Cao R, Ou Q, Ma Y, Bao H, Wu X, Shao Y, Wang Z, Shen B: Acquired rare recurrent EGFR mutations as mechanisms of resistance to Osimertinib in lung cancer and in silico structural modelling. Am J Cancer Res 2020, 10(11):4005-4015.

責任編輯丨BioTalker